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其实除了让绿铃自行破译,张遂也可以教她辨认简体字。

但这也未必能比让她自行破译快多少,还要占用他的时间。

于是张遂便把《破天机》交给绿铃阅览。

绿铃只用五分钟,就把整本书扫描进了自己的数据库。

张遂拿回书以后,担心绿铃短时间内无法破译简体字。

于是他决定仔细研读一下书中关于设计grna的内容。

然后再讲给绿铃,期望能对她的研究有所帮助。

crispr-cas9系统包括一个grna和cas9内切酶。

它们共同形成一个核糖核蛋白复合物。

grna是由crrna和tracrrna组成:

crrna是一个与目标dna互补配对的核苷酸序列,长度为17-20个碱基。

它是grna可定制的组件。

tracrrna,可以作为支架帮助cas9内切酶折叠。

grna能识别目标dna区域,并将cas9内切酶引导到那里进行编辑。

在原核细胞中,grna将内切酶引导至病毒dna。

而在实验中,经过设计的grna几乎可以定位任何有机体基因组上的任何位置。

grna需要目标基因组中存在特定的“前间隔序列邻近基序”,才能定位目标序列。

然后,cas9内切酶才能在目标序列处剪断dna,作为基因编辑的位置。

前间隔序列邻近基序,简称pa。

它是一个短的dna序列,通常为2-6碱基对长度。

pa是cas内切酶切割所必需的。

它通常处在切割位点下游3-4个核苷酸。

有许多不同cas内切酶可以从不同的细菌中纯化。

每种酶都能识别不同的pa序列。

所以当找不到某一pa序列时,可以尝试用另一种核酸酶。

它相应的pa序列就可能存在于目标基因组中。

如果pa序列匹配正确,并且grna成功地与目标位点结合,

那么cas9会在pa序列上游约3-4个核苷酸进行dna双链的切割。

等张遂基本理解这部分内容,觉得可以讲给绿铃之时,已经过了3个小时。

“铃儿,过来一下,”张遂冲绿铃招手,“我给你讲讲如何设计向导阴符链。”

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